Toepassing van HPLC-analyse in roterende verdamper

Hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC) wordt ook hogedrukvloeistofchromatografie, hogesnelheidsvloeistofchromatografie, hogeresolutievloeistofchromatografie en moderne kolomchromatografie genoemd. Het is een efficiënte en snelle analytische scheidingstechnologie die in de jaren zeventig snel is ontwikkeld en een belangrijk middel is voor moderne scheidingstests.

Hoge prestatie vloeistofchromatografie (HPLC) maakt gebruik van vloeistof als mobiele fase en maakt gebruik van een hogedrukinfusiesysteem om de mobiele fase, zoals een enkel oplosmiddel met verschillende polariteiten of een gemengd oplosmiddel en bufferoplossing met verschillende verhoudingen, in de chromatografische kolom met stationaire fase te pompen. Nadat de componenten in de kolom zijn gescheiden, gaan ze de detector binnen voor detectie, om de analyse van het monster te realiseren.

Het scheidingsmechanisme van hogedrukvloeistofchromatografie is hetzelfde als dat van conventionele kolomchromatografie, maar de pakking is fijner en moet worden aangedreven door een hogedrukpomp, die een hoge kolomefficiëntie en een hoge analysesnelheid heeft. Anders dan bij gaschromatografie neemt de mobiele fase bij vloeistofchromatografie ook deel aan het scheidingsproces van componenten, en de samenstelling, verhouding en pH-waarde kunnen flexibel worden aangepast, met verschillende scheidingsmodi. In de praktijk worden de retentiewaarde en selectiviteit van monsters in de chromatografische kolom aangepast door de samenstelling van de mobiele fase te veranderen, zodat verschillende monsters kunnen worden gescheiden.

 

Componenten van HPLC-analyse

 

Kolom: De kolom is de kerncomponent van het HPLC-systeem, dat wordt gebruikt om de verbindingen in het monster te scheiden. Veel voorkomende scheidingskolommen zijn onder meer een omgekeerde fasekolom, een ionenuitwisselingskolom, een gelfiltratiekolom, enz., en hun selectie hangt af van de eigenschappen van de te scheiden verbinding en het analysedoel.

Mobiele fase: Mobiele fase is een combinatie van oplosmiddelen die bij HPLC wordt gebruikt om een ​​monster door een scheidingskolom te leiden. De mobiele fase bestaat doorgaans uit een mengsel van oplosmiddelen, dat een enkel oplosmiddel kan zijn of een mengsel van meerdere oplosmiddelen in een bepaalde verhouding. Het kiezen van de juiste stroom is erg belangrijk voor het scheidingseffect.

Pomp: De pomp wordt gebruikt om de mobiele fase te leveren en deze met een bepaalde druk door de scheidingskolom te duwen. Veel voorkomende pompen zijn onder meer een constante drukpomp en een gradiëntpomp. De gradiëntpomp kan een lineaire of niet-lineaire verandering van de samenstelling van de mobiele fase realiseren, om een ​​beter scheidingseffect te verkrijgen.

Injector: Injector wordt gebruikt om het te analyseren monster in het HPLC-systeem te brengen. De monsternemer kan een handmatig bediende spuit of een automatische monsternemer zijn. Ze hebben meestal de kenmerken van nauwkeurig volume en goede herhaalbaarheid om nauwkeurige monsterinjectie te garanderen.

Kolomoven: De kolomoven wordt gebruikt om de temperatuur van de scheidingskolom te regelen. Door de temperatuur te regelen kunnen de verdelingscoëfficiënt en de scheidingssnelheid van het monster in de kolom worden gewijzigd, waardoor het scheidingseffect wordt geoptimaliseerd.

Detector: De detector wordt gebruikt om de afgescheiden verbinding te detecteren en een elektrisch signaal te genereren dat verband houdt met de concentratie ervan. Veel voorkomende detectoren zijn onder meer ultraviolet-zichtbare absorptiedetector, fluorescentiedetector en elektrochemische detector. De keuze van de detector hangt af van de kenmerken van de te analyseren verbinding en de vereisten voor detectiegevoeligheid.

Data-acquisitie systeem: Het data-acquisitiesysteem wordt gebruikt om de door de detector afgegeven signalen te ontvangen, op te nemen en te analyseren. Het kan het gedetecteerde signaal omzetten in parameters zoals piekoppervlak en retentietijd, en analyse en interpretatie van de resultaten mogelijk maken.

 

Nadat het oplosmiddel is verwijderd doordraaiende vernevelaar, is het verkregen monster gewoonlijk geconcentreerd of vast. Als u de verbindingen in het monster verder wilt analyseren of detecteren, kunt u deze analyseren met behulp van hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC).

Algemene stappen voor het analyseren van monsters na rotatieverdamping door HPLC

 

1. Monsteroplossing: los het monster op na rotatieverdamping in een geschikt oplosmiddel. Bij de keuze van oplosmiddelen moet rekening worden gehouden met de oplosbaarheid van de te analyseren stof en de eisen van de HPLC-analyseomstandigheden.

2. Bereiding van de standaardoplossing: Als kwantitatieve analyse nodig is, kan de standaardoplossing van de te testen verbinding worden voorbereid voor daaropvolgende correctie en berekening van de analyseresultaten.

3. Voer HPLC-analyse uit: injecteer het monster in het HPLC-systeem en stel de juiste scheidingskolom, mobiele fase en detector op. Selecteer, afhankelijk van het doel van de analyse, geschikte methoden en parameters, zoals debiet, temperatuur en gradiëntprogramma.

4. Gegevensverzameling en analyse: het chromatogram van het monster wordt verzameld door een HPLC-systeem en de doelverbinding wordt gekwantificeerd of geïdentificeerd op basis van het piekgebied, de retentietijd of andere gerelateerde parameters. Voor kwantitatieve analyse kunnen de standaardcurvemethode en de interne standaardmethode worden gebruikt.

5. Resultateninterpretatie: Volgens de analyseresultaten werden de verbindingen in het monster kwalitatief en kwantitatief geëvalueerd. Afhankelijk van uw behoeften kunt u rapporten genereren of analyseresultaten vastleggen.

 

De toepassing van rotovap bij HPLC-analyse heeft twee praktische betekenissen

 

• Monsterconcentratie: In sommige gevallen kan de concentratie van het te analyseren monster te laag zijn, zodat de chemische rotatieverdamper kan worden gebruikt om het monster te concentreren om de detectiegevoeligheid van de analyt bij HPLC te vergroten.
• Verwijdering van oplosmiddelen: In sommige monsters kunnen oplosmiddelen de HPLC-analyse verstoren. Daarom is het noodzakelijk de oplosmiddelen in de monsters te verwijderen of te vervangen door oplosmiddelen die geschikt zijn voor HPLC. De rotatieverdamper in het laboratorium kan helpen het oplosmiddel te verwijderen en het monster om te zetten in een vorm die geschikt is voor HPLC-analyse.

 

HPLC-analyse endraaiende vernevelaarzijn twee veelgebruikte technieken bij chemische analyse, en ze hebben enkele verschillen en verbanden in principe en toepassing.

 

Verschil

 

Beginsel: HPLC is gebaseerd op het principe van vloeistofchromatografie, en de scheiding en kwantitatieve analyse worden gerealiseerd door de interactie tussen de stationaire fase (kolom) en de mobiele fase (oplosmiddel). De verdamper gebruikt het principe van verwarming en rotatie om het vloeibare monster snel te verdampen en het oplosmiddel te verwijderen, om het monster te concentreren of de oplosmiddelomgeving van het monster te veranderen.

Toepassingsveld: HPLC wordt veel gebruikt in de chemie, de farmacie, het milieu en andere gebieden, en kan worden gebruikt voor scheiding, identificatie en kwantitatieve analyse van verbindingen in complexe mengsels; Roterende verdamping wordt voornamelijk gebruikt bij het concentreren van monsters, het verwijderen van oplosmiddelen en het voorbereiden van monsters, en wordt vaak gebruikt bij organische synthese, extractie van natuurlijke producten, monstervoorbereiding en andere gebieden.

Analyse snelheid: HPLC-analyse duurt gewoonlijk lang om de monsters te scheiden en te detecteren, wat enkele minuten tot enkele uren kan duren; De vacuümrotatieverdamper kan vloeistofmonsters snel en in korte tijd verdampen, meestal slechts enkele minuten.

 

Aansluiten

 

Voorbeeld behandeling: Roterende verdampingsapparatuur wordt vaak gebruikt om monsters te concentreren of oplosmiddelen te verwijderen tijdens de monstervoorbereiding om monsters geschikt te maken voor verdere analysemethoden, zoals HPLC. Het effect en de nauwkeurigheid van HPLC-analyse kunnen worden verbeterd door het monster te concentreren en het oplosmiddel te verwijderen met behulp van een roterende verdamper.

Selectie van oplosmiddelen: Bij HPLC-analyse is de keuze van het oplosmiddel erg belangrijk voor het scheidingseffect; Dedraaiende vernevelaarkan helpen het oplosmiddel uit het monster te verwijderen en het monster om te zetten in een vorm die geschikt is voor HPLC-analyse. Daarom kan de roterende verdamper bevredigende oplosmiddelomstandigheden bieden voor HPLC-analyse.

 

Wij bieden handmatig heffende rotovap en elektrisch heffende rotovap, neem dan contact met ons opsales@achievechem.comom uw eigen roterende verdampermachine aan te passen.