Omgekeerde kolomchromatografie
2. chromatografische kolom (rotatietype)
3. chromatografische kolom (handleiding)
*** Prijslijst voor geheel hierboven, informeer ons om te krijgen
Beschrijving
Technische Parameters
Omgekeerde kolomchromatografie, ook bekend als omgekeerde-fase chromatografie, is een veel gebruikte techniek in analytische en preparatieve chemie, met name op het gebied van biochemie en proteomics . Deze methode gebruikt een stationaire fase met niet-polaire of hydrofobe eigenschappen, zoals alkylketens (vaak C8, C18) bindtjes, typisch. Op water gebaseerd met organische modificaties zoals acetonitril of methanol .
Het scheidingsprincipe hangt af van de differentiële oplosbaarheid van analyten tussen de mobiele en stationaire fasen . Naarmate de compositie van de mobiele fase geleidelijk meer organisch wordt, zijn analyten met hogere hydrofobiciteit beter op elkaar in verband met de stationaire fase, wat leidt tot vertraagde elutions, die het is, is de affess van deze affess zeer effectief voor molecules, het is een zeer effectieve afwerking van de disige polariteiten. Ondispensabel voor het zuiveren van eiwitten, peptiden en andere biomoleculen .
Parameters
Toepassingen
Biologie
Omgekeerde fasechromatografie (RPC) is een zeer effectieve methode voor het scheiden van complexe eiwitmengsels, zoals serum . De techniek maakt gebruik van de niet-polaire aard van de stationaire fase en de polaire aard van de mobiele fase om scheiding te bereiken op basis van de hydrofobe interacties tussen de eiwitten en de stationaire fase.
RPC's hoge efficiëntie en selectiviteit komen voort uit zijn vermogen om eiwitten op te lossen met subtiele verschillen in hun hydrofobe eigenschappen . Dit maakt het een ideale keuze voor het isoleren en zuiveren van specifieke eiwitten van biologische monsters, waarbij zuiverheid en opbrengst kritisch zijn .}
In de context van serumscheiding kan RPC worden gebruikt om afzonderlijke eiwitten of eiwitfracties te scheiden op basis van hun bindingsaffiniteit aan de stationaire fase . door de samenstelling van de mobiele fases en de stroomsnelheid zorgvuldig te selecteren, kunnen onderzoekers de scheidingsvoorwaarden optimaliseren om de scheiding van doelwiteiwitten te minimaliseren, terwijl de co-elution van contaminanten.} {2.} {2.}} {2. {2 {2.} . . selecteren.
RPC biedt ook het voordeel dat het schaalbaar is, waardoor het geschikt is voor zowel eiwitzuivering op laboratoriumschaal als productieprocessen op grotere schaal . Bovendien kunnen RPC-kolommen eenvoudig worden hergebruikt en geregenereerd, waardoor de kosten en het afval . worden verminderd,
Samenvattend is RPC een krachtig hulpmiddel voor het scheiden van complexe eiwitmengsels, zoals serum, en de hoge efficiëntie en selectiviteit maken het een uitstekende keuze voor het isoleren en zuiveren van specifieke eiwitten van biologische monsters .
Farmaceutische industrie
Omgekeerde fasechromatografie (RPC) speelt een cruciale rol in de farmaceutische industrie, met name bij de scheiding en zuivering van geneesmiddelen, waaronder geneesmiddelen tegen kanker en antibiotica .
De zuiverheid en kwaliteit van medicijnen zijn van het grootste belang voor hun werkzaamheid en veiligheid . RPC biedt een zeer efficiënte en selectieve methode voor het isoleren en zuiveren van geneesmiddelen van complexe mengsels, waardoor het eindproduct voldoet aan rigoureuze kwaliteitsnormen .
RPC werkt door gebruik te maken van de verschillen in hydrofobe interacties tussen de medicijnmoleculen en de stationaire fase . door de samenstelling van de mobiele fasen en het stroomsnelheid aan te passen, onderzoekers kunnen de scheidingscondities aanpassen om de zuiverheid en opbrengst van het doelgeneesmiddel te maximaliseren terwijl het beoogde medicijn wordt geminimaliseerd, terwijl het vervuiling wordt geminimaliseerd .}
In het geval van geneesmiddelen tegen kanker en antibiotica is RPC bijzonder waardevol omdat deze medicijnen vaak smalle therapeutische vensters hebben en zeer gevoelig zijn voor onzuiverheden . RPC's vermogen om hoge niveaus van zuiverheid en selectiviteit te bereiken, maakt het een ideale keuze om de kwaliteit en veiligheid van deze kritieke medicijnen te waarborgen {
Verder is RPC compatibel met een breed scala aan oplosmiddelen en stationaire fasen, waardoor flexibiliteit mogelijk is bij het optimaliseren van scheidingscondities voor verschillende geneesmiddelen . Dit maakt RPC een veelzijdig en betrouwbaar hulpmiddel voor drugszuivering in de farmaceutische industrie .
Samenvattend is RPC een essentiële techniek in de farmaceutische industrie voor de scheiding en zuivering van geneesmiddelen, inclusief geneesmiddelen tegen kanker en antibiotica . Het vermogen om de zuiverheid en kwaliteit van deze medicijnen te waarborgen is cruciaal voor hun werkzaamheid en veiligheid .}
|
|
|
Voedselanalyse
Omgekeerde fasechromatografie (RPC) is een waardevolle techniek in voedselanalyse voor het scheiden en analyseren van verbindingen met verschillende hydrofobiciteiten, zoals eiwitten, suikers en lipiden .
In de voedingsindustrie is het begrijpen van de samenstelling van voedselmonsters van cruciaal belang voor kwaliteitscontrole, voedingslabel en het waarborgen van de naleving van de regelgevingsstandaarden . RPC biedt een zeer effectief middel om deze componenten te scheiden en te kwantificeren, waardoor nauwkeurige en betrouwbare analyse . mogelijk is.
RPC werkt door de verschillen in hydrofobe interacties tussen de analyten en de stationaire fase . te benutten door de samenstelling van de mobiele fases en het stroomsnelheid zorgvuldig te selecteren, kunnen onderzoekers de scheidingsvoorwaarden aanpassen om de scheiding van doelverbindingen te optimaliseren terwijl de interferentie van andere componenten in de sample.}}}} minimaliseert.
In het geval van eiwitten, suikers en lipiden kunnen RPC bijvoorbeeld worden gebruikt om deze verbindingen te scheiden en te kwantificeren op basis van hun relatieve hydrofobiciteit {. Deze informatie is cruciaal voor het beoordelen van het voedingsgehalte van voedselmonsters en ervoor te zorgen dat voedingslabels nauwkeurig is .
RPC is ook met name nuttig voor het detecteren van verontreinigingen of vervalsers in voedselmonsters . door de componenten van een voedselmonster te scheiden en te analyseren, kan RPC helpen bij het identificeren van de aanwezigheid van ongewenste stoffen, zoals pesticiden, zware metalen of niet -geautoriseerde additieven .
In summary, RPC is a powerful tool in food analysis for separating and analyzing compounds with different hydrophobicities, such as proteins, sugars, and lipids. Its ability to provide accurate and reliable information about the composition of food samples is essential for food quality control, nutritional labeling, and ensuring compliance with regulatory standards.
Scheikunde
Omgekeerde kolomchromatografieis een veelzijdige techniek die toepassingen vindt bij de scheiding van verschillende chemische verbindingen, met name die met verschillende polariteiten .
RPC werkt door de verschillen in hydrofobe interacties tussen de analyten en de stationaire fase te gebruiken . Dit maakt het bijzonder effectief voor het scheiden van verbindingen met verschillende polariteiten, omdat deze verschillen in polariteit kunnen leiden tot significante verschillen in hydrofobe interacties .}}}}
Een van de belangrijkste voordelen van RPC is het vermogen om een breed scala aan oplosmiddelen en omstandigheden te verwerken . Met deze veelzijdigheid kan onderzoekers de scheidingscondities voor verschillende chemische verbindingen optimaliseren, waardoor de scheiding zowel efficiënt als effectief is .
RPC kan bijvoorbeeld worden gebruikt om verbindingen te scheiden op basis van hun oplosbaarheid in verschillende oplosmiddelen, hun molecuulgewicht of hun chemische structuur . door de samenstelling van mobiele fases, stroomsnelheid, stroomsnelheid en stationaire fase te selecteren, kunnen onderzoekers de scheidingsomstandigheden maximaliseren.
RPC is ook sterk aanpasbaar voor gebruik met verschillende detectiemethoden, zoals UV-VIS-spectroscopie, massaspectrometrie of refractieve indexdetectie . Dit maakt de gevoelige en selectieve detectie van doelverbindingen mogelijk, zelfs bij lage concentraties .
Samenvattend is RPC een veelzijdige techniek voor het scheiden van verschillende chemische verbindingen, met name die met verschillende polariteiten . het vermogen om een breed scala aan oplosmiddelen en omstandigheden aan te kunnen, gecombineerd met de compatibiliteit met verschillende detectiemethoden, maakt het een krachtig hulpmiddel voor verschillende chemische scheidingen .}
Effect van selectie van oplosmiddelen
Inomgekeerde kolomchromatografie, Selectie van oplosmiddelen is een cruciale stap, die een significante invloed heeft op de efficiëntie van de scheiding, piekvorm, detectiegevoeligheid en de levensduur van de chromatografische kolom .
Impact op scheidingseffect
Typen oplosmiddel en selectiviteit
Different types of solvents have different chemical properties, which will affect their interaction with the various components in the sample, thereby changing the selectivity of the separation. For instance, when analyzing the meta and para isomers of 4 - (chloromethyl) benzoic acid and 3 - (chloromethyl) benzoic acid, complete separation could not be Aanvankelijk bereikt met behulp van het acetonitrilesysteem . Maar na het vervangen van acetonitril door methanol, waren de piekvormen van de twee doelen goed en volledige scheiding konden worden bereikt . Dit geeft aan dat de wijziging in oplosmiddel een significant kan beïnvloeden van de selectiviteit van scheiding .} voor een aantal solventies, door het proberen van een oplosmiddel te beïnvloeden. Meer geschikte scheidingscondities kunnen worden gevonden .
Oplosmevent kracht en resolutie
Oplosmiddelsterkte verwijst naar het vermogen van een oplosmiddel om een monster uit een chromatografische kolom . te elueren. Intensiteiten . Het elutievermogen van Acetonitril is iets sterker dan dat van methanol ., wanneer gemengd met water in dezelfde verhouding, kan het de steekproef effectiever elueren . volgens de resolutie -vergelijking kan de resolutie -invloed de scheidingssterkte beïnvloeden en de scheidingssterkte beïnvloeden en de scheidingssterkte beïnvloed Effect .
Impact op piekvorm
Abnormale oplosmiddel elutie -intensiteit en piekvorm
The elution intensity of the sample solvent has an important influence on the peak shape. When a solvent or solution with a significantly higher elution intensity than the mobile phase is used for dissolution, it often leads to problems such as decreased column efficiency, peak front, and forked peaks at the peak front. For instance, when analyzing chloramphenicol, the mobile phase was methanol: water=40: 60. Als chlooramphenicol werd opgelost in methanol, was het plaattelling minder dan 32, 000 /m ³ . later werd de mobiele fase gebruikt voor oplossing, en de plaatstelling van 90,000}}}}}}}}}}}}}}} Elution monster oplosmiddel verhoogt lokaal de elutie -intensiteit van de mobiele fase, waardoor inconsistente retentie tussen de voor- en achterste delen van een enkele component wordt veroorzaakt (het voordeel beweegt sneller en het achterste gedeelte beweegt langzamer), wat op zijn beurt leidt tot regionale verbreding en de piekvorm . beweegt.
Compatibiliteit tussen het oplosmiddel en de mobiele fase
Slechte compatibiliteit tussen het oplosmiddel en de mobiele fase kan ook leiden tot abnormale piekvormen . Als het oplosmiddel dat wordt gebruikt voor de opgeloste stof een slechte compatibiliteit heeft met de mobiele fase, zal het de overdracht van de opgeloste stof en de mobiele fase van de stationaire fase.}}}.}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}, aanzienlijk beïnvloeden. en benzeen, die een slechte compatibiliteit hebben met de mobiele fase, worden gebruikt als monsteroplosmiddelen, de opgeloste stof kan de opgeloste stof rechtstreeks omhullen en het initiële retentieproces van chromatografie . omzeilen zodra het oplosmiddelverdelingsevenwicht is, kan de solute worden opgelost, de solute kan worden vastgelegd, de solute kan worden ingesteld, de oplossingsoplosser.
Impact op detectiegevoeligheid
Ultraviolette absorptie van oplosmiddelen
De ultraviolette absorptiekarakteristieken van het oplosmiddel hebben invloed op de gevoeligheid van de detectie . in het ultraviolet -gebied, met name het verre ultraviolet gebied (bijna 200 nm), de absorptie van acetonitril is echter veel lager dan die van methanol . onder isometrische omstandigheden, het effect van dit verschil is echter niet voor de hand van dit verschil. Elutie wordt gebruikt, de basislijnafwijking veroorzaakt door acetonitril is veel kleiner dan die van methanol . Dus, wanneer acetonitril wordt gebruikt als de mobiele fase, is het resulterende chromatogram niet alleen esthetisch aangenaam, maar ook een veel lagere detectielimiet voor het monster {. Cut-off golflengten zoals acetonitril moeten worden geselecteerd om basislijnruis te verminderen en de detectiegevoeligheid te verbeteren .
Zuiverheid van het oplosmiddel
De zuiverheid van het oplosmiddel heeft ook een impact op de detectiegevoeligheid . chromatografische kwaliteit oplosmiddelen moeten zoveel mogelijk worden gebruikt om de interferentie van onzuiverheden op de detector te verminderen . Impurities in niet-chromatografische pure oplosmiddelen kunnen absorptie veroorzaken bij de detectiewavelgte, de basis van de detectie van de detectie van de detectie-wavellengte, de basis van de detectie van de detectie van de detectie van de detectie-wavellengte.
Impact op de levensduur van chromatografische kolommen
Polariteit van het oplosmiddel
De polariteit van het oplosmiddel heeft een zekere invloed op de levensduur van de chromatografische kolom . stoffen met sterke polariteit zoals methanol, water en ijzige azijnzuur kunnen silicagelgepakte kolommen beschadigen, terwijl stoffen met lage polar-oplossingen kan schade schade CoCing Cation Coction Cation Uitwisselharschromatografische kolommen, en zure oplossingen zijn vatbaar voor schade anionuitwisselingsharskolommen . Bijvoorbeeld bij het gebruik van verpakkingsmaterialen op basis van silicagel is het essentieel om aandacht te schenken aan het pH -bereik van de mobiele fase . in het algemeen, het pH -bereik van C18 -kolommen is tussen 2 en { van de gebonden fase . Wanneer de pH -waarde groter is dan 7, is silicagel vatbaar voor oplossing . frequent gebruik van bufferoplossing Stationaire fase vereist degradatie .
Zuiverheid en onzuiverheden van het oplosmiddel
De in de trace onoplosbare onzuiverheidsdeeltjes in het oplosmiddel kunnen eenvoudig worden vastgehouden aan de kop van de chromatografische kolom . In de loop van de tijd leidt dit tot mechanische blokkade van de chromatografische kolom, waardoor een toename van kolomdruk wordt gemaakt en het is om normaal te gebruiken, moet u de servicerevens van de chromatografische kolom .}}}}}} van chromatografie. gebruik .
Populaire tags: Omgekeerde kolomchromatografie, China reverse kolomchromatografie fabrikanten, leveranciers, fabriek
Een paar
Guardkolom in chromatografieVolgende
VacuümkolomchromatografieAanvraag sturen
