HPLC -kolomchromatografie
2. Chromatografische kolom (rotatietype)
3. Chromatografische kolom (handleiding)
*** Prijslijst voor geheel hierboven, informeer ons om te krijgen
Beschrijving
Technische Parameters
HPLC -kolomchromatografie, ook bekend als vloeistofchromatografie met hoge prestaties (vloeistofchromatografie met hoge prestaties), is een kolom vloeistofchromatografie met hoge scheidingsefficiëntie en is ook een belangrijke tak van chromatografie.
Het scheidt de componenten in het monster op basis van het verschil in adsorptiekracht en partitiecoëfficiënt tussen de vaste fase en de mobiele fase. Onder een hogedruk infusiesysteem, een mobiele fase (meestal een enkel oplosmiddel of een mengsel van oplosmiddelen met verschillende polariteiten) wordt gepompt in een kolom die een stationaire fase bevat. Wanneer elk component in het monster door de chromatogramkolom gaat, vanwege de verschillende grootte en sterkte van de interactie met de stationaire fase (zoals adsorptie, verdeling, uitsluiting, affiniteit), is de verblijftijd in de stationaire fase ook anders, om de scheiding van elke component te bereiken. De gescheiden componenten gaan vervolgens de detector in voor detectie, waardoor kwalitatieve en kwantitatieve informatie van elke component wordt verkregen.
Parameter
Toepassingen in farmaceutische analyse
Toepassing van HPLC -kolomchromatografie in geneesmiddelanalyse
Als een belangrijke technologie voor scheidingsanalyse heeft hoge prestaties vloeistofchromatografie (HPLC) een groot toepassingspotentieel en waarde aangetoond op het gebied van farmaceutische analyse sinds de snelle ontwikkeling in de jaren zeventig. Door de scheidingsprincipes van klassieke vloeistofchromatografie en gaschromatografie te combineren, is HPLC een onmisbaar hulpmiddel geworden in geneesmiddelanalyse vanwege de efficiënte scheiding, snelle analyse, uitstekende detectiegevoeligheid en een breed scala van toepassingen.
Basisprincipes en kenmerken
Het maakt gebruik van de interactie van de vaste en mobiele fasen om de verschillende componenten van het mengsel geleidelijk te scheiden. De stationaire fase kan een vaste stof of een vloeistof zijn die aan een vaste stof is bevestigd, terwijl de mobiele fase een vloeistof of een gas is. In HPLC wordt het oplosmiddel door de kolom gedwongen bij hoge drukken van maximaal honderden atmosferen, waardoor de scheidingsefficiëntie aanzienlijk wordt verbeterd. Volgens het verschillende scheidingsmechanisme kan HPLC worden verdeeld in normale fase HPLC, omgekeerde fase HPLC, ionenuitwisseling HPLC en volume -uitsluiting HPLC. Elk type heeft zijn specifieke toepassingsomvang en scheidingsmechanisme, zoals normale fase HPLC om analyten te scheiden op basis van polariteit en omgekeerde fase HPLC om te scheiden met behulp van hydrofobe interacties.
De kenmerken van HPLC -kolomchromatografie worden voornamelijk weerspiegeld in de volgende aspecten:
Hoge scheidingsefficiëntie: HPLC maakt een efficiënte scheiding van complexe mengsels mogelijk dankzij hogedrukinfusiepompen en hoge prestaties.
Hoge gevoeligheid: moderne detectoren, zoals ultraviolette absorptiedetectoren, fluorescentiedetectoren, massaspectrometriedetectoren, enz., Zaken HPLC een extreem hoge detectiegevoeligheid.
Breed scala aan toepassingen: HPLC wordt niet beperkt door de volatiliteit en thermische stabiliteit van het monster en kan thermische onstabiele fysiologische actieve stoffen met een hoog kookpunt analyseren en niet gemakkelijk te verdampen.
Hoge mate van automatisering: de meeste moderne HPLC -instrumenten zijn uitgerust met automatische sampler- en gegevensverwerker, die de automatisering van analyse en snelle gegevensverwerking kunnen realiseren.
 |
 |
 |
 |
Specifieke toepassing in geneesmiddelanalyse
HPLC kan worden gebruikt voor analyse van de geneesmiddelensamenstelling om de actieve ingrediënten en schadelijke onzuiverheden van geneesmiddelen te bepalen. Door de analyse van flavonoïden, alkaloïden en andere actieve ingrediënten in Chinese medicinale materialen kunnen bijvoorbeeld de typen en inhoud van actieve ingrediënten worden bepaald om de kwaliteit en werkzaamheid van geneesmiddelen te waarborgen. Bovendien kan HPLC ook worden gebruikt voor analyse van geneesmiddelensamenstelling in westerse farmaceutische doseringsvormen, zoals injecties, tabletten, capsules, enz., Om ervoor te zorgen dat de samenstelling van het medicijn in het medicijn aan de gespecificeerde vereisten voldoet.
HPLC speelt een belangrijke rol bij het bepalen van de concentratie van geneesmiddelen. Door precies het medicijngehalte in een medicijn te bepalen, kan de veiligheid en effectiviteit van het medicijn worden gewaarborgd. Bij de analyse van antibioticumgeneesmiddelen kan HPLC bijvoorbeeld worden gebruikt om het antibioticum van het medicijn te bepalen om het antibacteriële effect van het medicijn te evalueren. Bovendien kan HPLC ook worden gebruikt om de concentratie van geneesmiddelen in organismen, zoals plasma, urine, weefsel en andere biologische monsters, te bepalen om de werkzaamheid en bijwerkingen van geneesmiddelen te evalueren.
HPLC speelt ook een belangrijke rol bij de evaluatie van geneesmiddelenkwaliteit. Door de analytische gegevens van verschillende partijen medicijnen te vergelijken, is het mogelijk om te evalueren of de kwaliteit van geneesmiddelen stabiel is. Bovendien kan HPLC ook worden gebruikt om de werkzaamheid en farmacokinetische kenmerken van nieuwe geneesmiddelen te bestuderen, wat wetenschappelijke basis biedt voor de ontwikkeling en marketing van nieuwe medicijnen. In het stadium van de ontwikkeling van nieuwe geneesmiddelen kunnen de absorptie, verdeling, metabolisme en uitscheiding van nieuwe geneesmiddelen bij dieren bijvoorbeeld worden bepaald door HPLC, om de werkzaamheid en farmacokinetische kenmerken van nieuwe geneesmiddelen te begrijpen en een sterke ondersteuning te bieden voor klinische onderzoeken en marketingtoepassingen van nieuwe geneesmiddelen.
Chirale medicijnen verwijzen naar medicijnmoleculen met chirale centra, en hun enantiomeren kunnen aanzienlijk variëren in vivo activiteit, metabolisme en toxiciteit. Daarom is het van groot belang om de enantiomeren van chirale medicijnen te isoleren en te bepalen. Deze chromatografie speelt een belangrijke rol bij de analyse van chirale geneesmiddelen. Door het introduceren van chirale stationaire fase of chirale mobiele fase -additief, kunnen chirale geneesmiddelen enantiomeren worden gescheiden en effectief worden bepaald. Voor optisch actieve aminozuurgeneesmiddelen kunnen verschillende enantiomeren bijvoorbeeld worden gescheiden en bepaald door deze chromatografie om de biologische activiteit en toxiciteit van het medicijn te evalueren.
Natuurlijke geneesmiddelen komen uit een breed scala aan bronnen met complexe samenstellingen en kunnen een verscheidenheid aan bioactieve verbindingen bevatten. De kolomchromatografie speelt een belangrijke rol bij de analyse van natuurlijke geneesmiddelen. Door de chromatografische omstandigheden te optimaliseren en een geschikte mobiele fase te selecteren, kan efficiënte scheiding en bepaling van actieve componenten in natuurlijke geneesmiddelen worden gerealiseerd. Deze chromatografiemethode werd bijvoorbeeld gebruikt om de actieve componenten van Chinese kruidengeneeskunde, zoals flavonoïden en saponines, te scheiden en te bepalen om hun typen en inhoud te begrijpen en om sterke ondersteuning te bieden voor de kwaliteitscontrole, ontwikkeling en gebruik van de Chinese kruidengeneeskunde.
Voordelen en uitdagingen van HPLC -kolomchromatografie in geneesmiddelanalyse
De chromatografische methode heeft de voordelen van hoge scheidingsefficiëntie, hoge gevoeligheid, breed applicatiebereik en hoge mate van automatisering bij geneesmiddelanalyse. In de praktische toepassing staat het echter ook voor enkele uitdagingen. De voorbehandeling van het monster is bijvoorbeeld zeer veeleisend om de zuiverheid en stabiliteit van het monster te waarborgen; Hoge analytische kosten, waaronder het verwerven van instrument, onderhoud, chromatografische en mobiele faseverbruik; Bovendien kan HPLC voor sommige componenten met een sterke polariteit of een groot molecuulgewicht niet volledig scheiden of slecht detecteren. Daarom moet in praktische toepassingen de meest geschikte analysemethode worden geselecteerd op basis van de kwaliteitsvereisten van specifieke geneesmiddelen en de feitelijke situatie.
Toekomstige vooruitzichten
Met de voortgang van wetenschap en technologie en de ontwikkeling van hoogwaardige vloeistofchromatografietechnologie, zal de toepassing ervan in geneesmiddelanalyse breder zijn. Enerzijds zal de ontwikkeling van nieuwe stationaire fasematerialen het toepassingsbereik van krachtige vloeistofchromatografie sterk uitbreiden en de scheidingsefficiëntie en selectiviteit verbeteren. Anderzijds zullen HPLC -instrumenten intelligenter en geautomatiseerd zijn, de kolomstatus in realtime bewaken door geïntegreerde sensoren, waardoor voorspellend onderhoud mogelijk is, downtime vermindert en experimentele processen optimaliseert. Bovendien kan het systeem in combinatie met big data -analysetechnologie de bedrijfsparameters automatisch aanpassen aan de beste scheidingsomstandigheden van verschillende monsters, waardoor de experimentele efficiëntie en betrouwbaarheid van de resultaten worden verbeterd. Deze vorderingen zullen efficiëntere, nauwkeurige en betrouwbare analytische hulpmiddelen bieden voor geneesmiddelenanalyse, het stimuleren van de ontwikkeling van geneesmiddelenontdekking en kwaliteitscontrole.
Samenvattend speelt dit soort chromatografie een belangrijke rol bij de analyse van geneesmiddelen en heeft het brede toepassingsperspectieven. Door de chromatografische omstandigheden continu te optimaliseren, geschikte mobiele en stationaire fasen te selecteren, nieuwe detectietechnologieën en -apparatuur te introduceren, de nauwkeurigheid en betrouwbaarheid ervan in de analyse van geneesmiddelen verder te verbeteren en meer krachtige ondersteuning te bieden voor de ontwikkeling van geneesmiddelen, kwaliteitscontrole en klinisch drugsgebruik.
Verdiensten en demerits
Voordeel
Efficiënte scheiding
HPLC -kolomchromatografie maakt gebruik van hogedrukinfusiepomp en stationaire fase met een hoge efficiëntie, waardoor kolomefficiëntie veel hoger is dan klassieke vloeistofchromatografie, en een efficiënte scheiding van complexe mengsels kan realiseren.
Hoge gevoeligheid
Uitgerust met hoge gevoeligheidsdetectoren, zoals ultraviolette detectoren, fluorescentiedetectoren, enz., Kunnen lage concentraties monsters detecteren, wat vooral belangrijk is voor sporenanalyse.
Veel gebruikt
Het wordt niet beperkt door de volatiliteit en thermische stabiliteit van het monster en kan de organische stof analyseren met een hoog kookpunt, slechte thermische stabiliteit en grote relatieve moleculaire massa, en heeft een breed scala aan toepassingen.
Goede selectie
Er zijn veel soorten mobiele fase en de selectiviteit van scheiding kan worden verbeterd door het type en de samenstelling van de mobiele fase te wijzigen om te voldoen aan de analytische vereisten van verschillende monsters.
Hoge mate van automatisering
De meeste moderne HPLC -instrumenten zijn uitgerust met automatische sampler- en gegevensverwerker, die de automatisering van analyse kunnen realiseren en de efficiëntie van analyse kunnen verbeteren.
Monsterherstel is eenvoudig
Het monster wordt niet vernietigd na het passeren van de kolom en een enkele component kan worden verzameld of voorbereid, wat handig is voor latere experimenten of toepassingen.
Tekortkoming
De prijs- en dagelijkse onderhoudskosten van vloeistofchromatografen zijn hoog, inclusief kolomvervanging, mobiele faseverbruik en regelmatige kalibratie van het instrument.
Hoewel sneller dan klassieke vloeistofchromatografie, zijn HPLC -analysetijden nog steeds relatief lang in vergelijking met gaschromatografie, vooral voor de scheiding en analyse van complexe monsters.
Hoewel HPLC -instrumenten zeer geautomatiseerd zijn, vereisen de werking en het onderhoud van de instrumenten nog steeds een bepaald niveau van expertise en ervaring. Bovendien kan de voorbewerking van monsters ingewikkeld zijn.
Vanwege de onomkeerbare adsorptie van sommige verbindingen op de stationaire fase, mogen deze verbindingen niet effectief worden gedetecteerd, waardoor de nauwkeurigheid van de analyse wordt beïnvloed.
LC -scheiding wordt vaak sterk beïnvloed door kolomtemperatuur en consistente temperatuuromstandigheden moeten worden gehandhaafd om herhaalbare resultaten te verkrijgen, wat de complexiteit en kosten van het experiment verhoogt.
Voorzorgsmaatregelen bij de bepaling van de inhoud van het medicijn
 |
 |
 |
Deze methode heeft veel voorzorgsmaatregelen voor het bepalen van de inhoud van het geneesmiddel, wat erg belangrijk is om de nauwkeurigheid en betrouwbaarheid van de bepalingsresultaten te waarborgen. Hier zijn enkele belangrijke overwegingen:
Het verschil van de kolom heeft invloed op het retentiegedrag van het medicijn, zelfs als de kolomlengte, de binnendiameter, deeltjesgrootte van dezelfde kolom, vanwege de verschillende eigenschappen van de vulstof, de retentietijd en het piektype van het medicijn kunnen heel anders zijn. Daarom moet de juiste kolom worden geselecteerd op basis van de eigenschappen van het medicijn en de scheidingsbehoeften.
De kolom moet regelmatig worden gehandhaafd om besmetting en blokkade te voorkomen om de goede scheidingsprestaties te garanderen.
De bufferzout -pH van de mobiele fase heeft een significant effect op het retentiegedrag van geneesmiddelen en kan zelfs de piekorde van sommige geneesmiddelen veranderen. Daarom moet bij het optimaliseren van de mobiele fase speciale aandacht worden besteed aan de pH -waarde van het bufferzout.
De samenstelling van de mobiele fase beïnvloedt ook het scheidingseffect van het medicijn. Bij de bepaling van multivitamine -preparaten zullen veranderingen in de relatieve verhouding van natriumhexanenulfonaat en natriumheptaansulfonaat in de mobiele fase bijvoorbeeld de retentietijd en piekvorm van elke component beïnvloeden. Daarom moet de juiste samenstelling van mobiele fasen worden geselecteerd op basis van de aard van het medicijn en de analytische behoeften.
Het monsterafhandelingsproces moet zorgen voor de representativiteit en stabiliteit van het monster om afbraak of besmetting van het monster tijdens de verwerking te voorkomen.
Bij het wegen van het monster moet de additieve methode worden gebruikt om deze op zijn plaats te wegen om de nauwkeurigheid van het wegen te waarborgen. Tegelijkertijd moet de weegbewerking worden gestandaardiseerd om lekkage te voorkomen.
De kwaliteit van de referentie -substantie heeft een directe invloed op het resultaat van de bepaling van de inhoud. Daarom moet de kwaliteit van betrouwbare, nauwkeurige inhoud worden geselecteerd.
Controleproducten moeten worden opgeslagen zoals vereist om afbraak of besmetting te voorkomen. Als het bedieningsproduct in de koelkast wordt bewaard, moet het in de droge oven worden verwarmd voordat het weegt.
Het juiste detectortype moet worden geselecteerd op basis van de aard van het geneesmiddel en de analytische behoeften, zoals ultraviolette detector, fluorescentiedetector, enz.
De detector moet periodiek worden gekalibreerd om de nauwkeurigheid van de meetresultaten te waarborgen.
Redelijke statistische analyse van de meetgegevens om de betrouwbaarheid en herhaalbaarheid van de resultaten te waarborgen. De relatieve standaardafwijking (RSD) van het piekoppervlak kan bijvoorbeeld worden berekend om de precisie van de meetresultaten te evalueren.
Bij het berekenen van inhoud moeten betrouwbare methoden zoals externe of interne normen worden gebruikt en moet de lineariteit van de standaardcurve worden gewaarborgd.
Bij het vaststellen van een nieuwe methode voor het bepalen van de inhoud moet methodologische verificatie worden uitgevoerd, inclusief specificiteit, lineariteit, bereik, precisie, nauwkeurigheid, duurzaamheid enzovoort.
Methodologische verificatie is een belangrijk middel om ervoor te zorgen dat de meetmethode wetenschappelijk, redelijk en betrouwbaar is.
Zorg ervoor dat het instrument stabiel blijft tijdens het analyseproces, vooral bij het uitvoeren van multi-pins analyse, let op om te observeren of de responswaarde en piekvorm van het instrument stabiel zijn.
Als abnormale gegevens tijdens het analyseproces plaatsvinden, moet deze zorgvuldig worden gecontroleerd en geëlimineerd en indien nodig opnieuw geanalyseerd.
Populaire tags: HPLC -kolomchromatografie, China HPLC -kolomchromatografie fabrikanten, leveranciers, fabriek
Een paar
Industriële chromatografiekolomVolgende
Gravity -chromatografiekolommenAanvraag sturen
